ČESKÁ TECHNICKÁ NORMA

ICS 67.100.01                                                                                                                              Prosinec 2025

Mléčné výrobky – Stanovení počtu bifidobakterií – Technika počítání kolonií

ČSN
ISO 29981

56 0649

 

Milk products – Enumeration of bifidobacteria – Colony-count technique

Produits laitiers – Dénombrement des bifidobacteria présumés – Technique par comptage des colonies

Tato norma je českou verzí mezinárodní normy ISO 29981:2024. Překlad byl zajištěn Českou agenturou pro standardizaci. Má stejný status jako oficiální verze.

This standard is the Czech version of the International Standard ISO 29981:2024. It was translated by the Czech Standardization Agency. It has the same status as the official version.

Nahrazení předchozích norem

Touto normou se nahrazuje ČSN ISO 29981 (56 0649) z listopadu 2010.

 


Národní předmluva

Změny proti předchozí normě

Hlavní změny proti předchozí normě jsou uvedeny v předmluvě.

Informace o citovaných dokumentech

ISO 6887-1 zavedena v ČSN EN ISO 6887-1 (56 0102) Mikrobiologie potravinového řetězce – Příprava analytických vzorků, výchozí suspenze a desetinásobných ředění pro mikrobiologické zkoušení – Část 1: Obecná pravidla pro přípravu výchozí suspenze a desetinásobných ředění

ISO 6887-5 zavedena v ČSN EN ISO 6887-5 (56 0102) Mikrobiologie potravinového řetězce – Příprava analytických vzorků, výchozí suspenze a desetinásobných ředění pro mikrobiologické zkoušení – Část 5: Specifická pravidla pro vzorky mléka a mléčných výrobků

ISO 7218 zavedena v ČSN EN ISO 7218 (56 0103) Mikrobiologie potravinového řetězce – Obecné požadavky a návod pro mikrobiologické zkoušení

ISO 11133 zavedena v ČSN EN ISO 11133 (56 0099) Mikrobiologie potravin, krmiv a vody – Příprava, výroba, uchovávání a zkoušení výkonnosti kultivačních půd

ISO 19036:2019 zavedena v ČSN EN ISO 19036:2020 (56 0625) Mikrobiologie potravinového řetězce – Odhad nejistoty měření při kvantitativním stanovení

Souvisící ČSN

ČSN EN ISO 707 (57 0003) Mléko a mléčné výrobky – Návod pro odběr vzorků

ČSN EN ISO 16140-4 (56 0078) Mikrobiologie potravinového řetězce – Validace metody – Část 4: Protokol pro vnitrolaboratorní validaci metody

ČSN EN ISO 16140-6 (56 0078) Mikrobiologie potravinového řetězce – Validace metody – Část 6: Protokol pro validaci alternativních (chráněných) metod pro mikrobiologickou konfirmaci a typizačních postupů

ČSN EN ISO 17468 (56 0104) Mikrobiologie potravinového řetězce – Technické požadavky a návod pro zavedení nebo revizi normalizované referenční metody

Souvisící právní předpisy

Vyhláška č. 397/2016 Sb., o požadavcích na mléko a mléčné výrobky, mražené krémy a jedlé tuky a oleje

Upozornění na národní poznámky

Do této normy byly k článkům 6, 9.7 a 10 doplněny národní poznámky.

Vypracování normy

Zpracovatel odborného překladu: QUALIMENT Praha, komise České potravinářské společnosti, z. s., IČO 539525, spolupráce: Mgr. Dana Bělohlávková

Vydala: Česká agentura pro standardizaci, státní příspěvková organizace

Citované dokumenty a souvisící ČSN lze získat v e-shopu České agentury pro standardizaci, s. p. o.

Česká agentura pro standardizaci je státní příspěvková organizace zřízená Úřadem pro technickou normalizaci, metrologii a státní zkušebnictví na základě ustanovení § 5 odst. 2 zákona č. 22/1997 Sb., o technických požadavcích na výrobky a o změně a doplnění některých zákonů, ve znění pozdějších předpisů.

MEZINÁRODNÍ NORMA

Mléčné výrobky – Stanovení počtu bifidobakterií –                                                 ISO 29981
Technika počítání kolonií                                                                                                Druhé vydání
                                                                                                                                                2024-11

ICS 67.100.01

Obsah

Strana

Předmluva...................................................................................................................................................................................................... 5

Úvod................................................................................................................................................................................................................ 7

1......... Předmět normy................................................................................................................................................................................. 8

2......... Citované dokumenty........................................................................................................................................................................ 8

3......... Termíny a definice............................................................................................................................................................................ 8

4......... Podstata zkoušky............................................................................................................................................................................. 9

4.1...... Obecně............................................................................................................................................................................................... 9

4.2...... Příprava výchozí suspenze a desetinásobných ředění.............................................................................................................. 9

4.3...... Izolace a výběr pro konfirmaci........................................................................................................................................................ 9

4.4...... Konfirmace........................................................................................................................................................................................ 9

4.5...... Výpočet.............................................................................................................................................................................................. 9

5......... Kultivační půdy a činidla.................................................................................................................................................................. 9

6......... Vybavení a spotřební materiály................................................................................................................................................... 10

7......... Vzorkování...................................................................................................................................................................................... 10

8......... Příprava zkušebního vzorku......................................................................................................................................................... 10

9......... Postup zkoušky.............................................................................................................................................................................. 11

9.1...... Obecně............................................................................................................................................................................................ 11

9.2...... Příprava zkušebního podílu a primárního ředění...................................................................................................................... 11

9.2.1... Sušené mléčné výrobky (např. kojenecká mléčná výživa) včetně dehydratovaných startovacích
a probiotických kultur..................................................................................................................................................................... 11

9.2.2... Nesušené fermentované (např. jogurt) a nefermentované výrobky na bázi mléka (např. pasterovaná mléka)............. 11

9.3...... Mikroskopické vyšetření výchozí suspenze nebo primárního ředění (volitelné).................................................................. 11

9.4...... Příprava série desetinásobného ředění..................................................................................................................................... 11

9.5...... Inokulace a inkubace..................................................................................................................................................................... 11

9.6...... Počítání kolonií............................................................................................................................................................................... 12

9.7...... Konfirmace...................................................................................................................................................................................... 12

10....... Vyjádření výsledků......................................................................................................................................................................... 12

11....... Validace metody............................................................................................................................................................................. 12

11.1.... Validace v souladu s ISO 17468................................................................................................................................................. 12

11.2.... Výkonnostní charakteristiky.......................................................................................................................................................... 13

12....... Protokol o zkoušce......................................................................................................................................................................... 13

13....... Zajištění kvality............................................................................................................................................................................... 14

Strana

Příloha A (normativní) Vývojový diagram postupu............................................................................................................................... 15

Příloha B (normativní) Kultivační půdy a činidla................................................................................................................................... 16

Příloha C (informativní) Výkonnostní charakteristiky metody............................................................................................................. 20

Bibliografie................................................................................................................................................................................................... 22

Logo0052b

DOKUMENT CHRÁNĚNÝ COPYRIGHTEM

© ISO a IDF 2024

Veškerá práva vyhrazena. Žádná část této publikace nesmí být, není-li specifikováno jinak nebo nepožaduje-li se to v souvislosti s její
implementací, reprodukována nebo používána v jakékoliv formě nebo jakýmkoliv způsobem, elektronickým ani mechanickým, včetně
pořizování fotokopií nebo zveřejňování na internetu nebo intranetu, bez předchozího písemného souhlasu. O souhlas lze požádat buď ISO na níže uvedené adrese, nebo členskou organizaci ISO v zemi žadatele.

ISO copyright office                                                                        International Dairy Federation

CP 401 · Ch. de Blandonnet 8                                                        Silver Building • Bd Auguste Reyers 70/B

CH-1214 Vernier, Geneva                                                              B-1030 Brussels

Tel.: + 41 22 749 01 11                                                                   Phone: +32 2 325 67 40

                                                                                                        Fax: +32 2 325 67 41

E-mail: copyright@iso.org                                                               Email: mailto:info@fil-idf.org

Web: www.iso.org                                                                           Website: http://www.fil-idf.org

Publikováno ve Švýcarsku


Předmluva

ISO (Mezinárodní organizace pro normalizaci) je celosvětová federace národních normalizačních orgánů (členů ISO). Mezinárodní normy obvykle vypracovávají technické komise ISO. Každý člen ISO, který se zajímá o předmět, pro který byla vytvořena technická komise, má právo být v této technické komisi zastoupen. Práce se zúčastňují také vládní i nevládní mezinárodní organizace, s nimiž ISO navázala pracovní styk. ISO úzce spolupracuje s Mezi-
národní elektrotechnickou komisí (IEC) ve všech záležitostech normalizace v elektrotechnice.

Postupy použité při tvorbě tohoto dokumentu a postupy určené pro jeho další udržování jsou popsány ve směrnicích ISO/IEC, část 1. Zejména se má věnovat pozornost rozdílným schvalovacím kritériím potřebným pro různé druhy dokumentů ISO. Tento dokument byl vypracován v souladu s redakčními pravidly uvedenými ve směrnicích ISO/IEC, část 2 (viz www.iso.org/directives).

ISO upozorňuje na možnost, že implementace tohoto dokumentu smí vyžadovat využití patentu (patentů). V souvislosti s tím ISO nezaujímá žádné stanovisko týkající se důkazů, platnosti nebo použitelnosti všech uplatňovaných patentových práv. Ke dni zveřejnění tohoto dokumentu ISO neobdržela oznámení o patentu (patentech), který smí být vyžadován pro implementaci tohoto dokumentu. ISO však upozorňuje implementující organizace, že se nemusí jednat o nejnovější informace, které lze získat z databáze patentů dostupné na adrese www.iso.org/patents. ISO nelze činit odpovědnou za identifikaci všech takových patentových práv. Jakýkoliv obchodní název použitý v tomto dokumentu se uvádí jako informace pro usnadnění práce uživatelů a neznamená schválení.

Vysvětlení nezávazného charakteru technických norem, významu specifických termínů a výrazů ISO, které se vztahují k posuzování shody, jakož i informace o tom, jak ISO dodržuje principy Světové obchodní organizace (WTO) týkající se technických překážek obchodu (TBT), viz www.iso.org/iso/foreword.html.

Tento dokument vypracovala technická komise ISO/TC 34 Potravinářské výrobky, subkomise SC 5 Mléko a mléčné výrobky a Mezinárodní mlékárenská federace (IDF). Je publikován společně ISO a IDF.

Toto druhé vydání zrušuje a nahrazuje první vydání (ISO 29981|IDF 220:2010), které bylo technicky zrevidováno.

Hlavní změny jsou tyto:

    byly přidány ředicí roztoky, které mohou být použity;

    byla přidána příprava zkušebního podílu a primárního ředění pro sušené mléčné výrobky;

    byla zavedena nová kultivační půda TOS agar;

    bylo zahrnuto uchovávání inkubovaných ploten;

    bylo změněno vyjádření výsledků tak, aby bylo v souladu s ISO 7218;

    bylo zavedeno zkoušení výkonnosti kultivačních půd;

    byly zahrnuty výkonnostní charakteristiky spolu s výsledky mezilaboratorní studie, které jsou získány metodou z tohoto druhého vydání, jako příloha C.

Jakákoli zpětná vazba nebo otázky týkající se tohoto dokumentu mají být adresovány národnímu normalizačnímu orgánu uživatele. Úplný seznam těchto orgánů lze nalézt na adrese http://www.iso.org/members.html.

Mezinárodní mlékárenská federace (IDF) je nezisková soukromá organizace zastupující zájmy různých zainteresovaných stran v mlékárenství na celosvětové úrovni. Členové IDF jsou organizováni v národních komisích, což jsou národní sdružení složená ze zástupců zájmových skupin mlékárenského průmyslu včetně prvovýroby mléka (mléčných farem), mlékárenského zpracovatelského průmyslu, dodavatelů mléka a mléčných výrobků, vědců a orgánů státní správy/kontroly potravin.

ISO a IDF úzce spolupracují ve všech záležitostech normalizace týkajících se metod analýzy a odběru vzorků pro mléko a mléčné výrobky. Od roku 2001 ISO a IDF společně vydávají své mezinárodní normy pod značkou a refe-
renčním číslem obou organizací.

IDF upozorňuje na možnost, že implementace tohoto dokumentu smí vyžadovat využití patentu (patentů). V souvislosti s tím IDF nezaujímá žádné stanovisko týkající se důkazů, platnosti nebo použitelnosti všech uplatňovaných patentových práv. Ke dni zveřejnění tohoto dokumentu IDF neobdržela oznámení o patentu (patentech), který smí být vyžadován pro implementaci tohoto dokumentu. IDF však upozorňuje implementující organizace, že se nemusí jednat o nejnovější informace, které lze získat z databáze patentů dostupné na adrese www.iso.org/patents. IDF nelze činit odpovědnou za identifikaci všech takových patentových práv.

Jakýkoliv obchodní název použitý v tomto dokumentu se uvádí jako informace pro usnadnění práce uživatelů a neznamená schválení.

Tento dokument byl vypracován IDF Stálým výborem pro metody mléčné mikrobiologie a technickou komisí ISO/TC 34 Potravinářské výrobky, subkomise SC 5 Mléko a mléčné výrobky. Je publikován společně ISO a IDF.

Práce byla provedena IDF/ISO Projektovou skupinou (D09) Stálého výboru pro metody mléčné mikrobiologie pod záštitou vedoucího projektu, Masamichiho Muta (Japonsko).

Úvod

Bifidobakterie jsou charakterizovány jako neacidorezistentní, nesporotvorné, grampozitivní, nepohyblivé a kataláza negativní chemoorganotrofní tyčinky, které produkují kyselinu octovou, kyselinu mléčnou a kyselinu mravenčí. Glukóza je odbourávána výhradně a charakteristicky přes fruktóza-6-fosfátovou zkratku, v níž enzym fruktóza-6-fosfát fosfoketoláza (F6PPK, EC 4.1.2.22) štěpí fruktózu-6-fosfát na acetylfosfát a erythróza-4-fosfát.

Mnoho studií ukazuje, že bifidobakterie mají různé fyziologické funkce a jsou široce využívány v potravinách, a to jak v mléčných výrobcích, jako je jogurt, kojenecká výživa a sušené mléko, tak i v nemléčných výrobcích, jako jsou startovací a probiotické kultury. Mnoho výrobků obsahujících bifidobakterie na svém obalu uvádí počet bakteriálních buněk, což je důležitý indikátor funkčnosti. Přesná metoda stanovení počtu bifidobakterií, jako je ta uvedená v tomto dokumentu, je důležitá pro poskytnutí záruky počtu bakteriálních buněk.

Hlavní technické změny uvedené v předmluvě a zavedené do tohoto dokumentu jsou v porovnání s ISO 29981|IDF 220:2010 považovány za významné (viz ISO 17468). Tyto technické změny mají významný
dopad na výkonnostní charakteristiky metody.

1 Předmět normy

Tento dokument specifikuje metodu selektivního stanovení počtu bifidobakterií v mléčných výrobcích technikou počítání kolonií kultivovaných při 37 °C za anaerobních podmínek.

Tato metoda je použitelná pro mléčné výrobky, jako jsou fermentovaná (např. jogurty) a nefermentovaná mléka (např. pasterovaná mléka, odtučněná mléka, koncentráty syrovátkových bílkovin), sušená mléka a výživy (např. kojenecká výživa, pokračovací výživa pro starší kojence, výživa pro malé děti), kde jsou tyto bakterie přítomny, jsou životaschopné a vyskytují se v kombinaci s jinými bakteriemi mléčného kvašení nebo samostatně. Metoda je také použitelná pro startovací a probiotické kultury. Navrhovaná kritéria kvality mléčných výrobků viz například CXS 243-2003 [6].

Bifidobakterie používané v mléčných výrobcích obvykle náleží k následujícím druhům (např. odkazy [7] a [10]):

    Bifidobacterium adolescentis;

    B. animalis subsp. animalis;

    B. animalis subsp. lactis;

    B. bifidum;

    B. breve;

    B. longum subsp. infantis;

    B. longum subsp. longum.

 

 

Konec náhledu - text dále pokračuje v placené verzi ČSN.

Zdroj: www.cni.cz