Zdroj: www.cni.cz

ČESKÁ TECHNICKÁ NORMA

ICS 07.100.01                                                                                                                                     Únor 2006

Mikrobiologie potravin a krmiv - Horizontální metody
pro průkaz a stanovení počtu bakterií čeledi
Enterobacteriaceae -
Část 1: Průkaz a stanovení počtu technikou nejvýše
pravděpodobného počtu s předpomnožením

ČSN
ISO 21528-1

56 0096

 

Microbiology of food and animal feeding stuffs - Horizontal methods for the detection and enumeration
of Enterobacteriaceae - Part 1: Detection and enumeration by MPN technique with pre-enrichment

Microbiologie des aliments - Méthodes horizontales pour la recherche et le dénombrement de Enterobacteriaceae -
Partie 1: Recherche at dénombrement
à l`aide de la technique NPP avec préenrichissement

Mikrobiologie von Lebensmitteln und Futtermitteln - Horizontale Verfahren für den Nachweis und für die Zählung
von Enterobacteriaceae - Teil 1: Nachweis und MPN-Technik mit der Voranreicherung

Tato norma je českou verzí mezinárodní normy ISO 21528-1:2004. Mezinárodní norma ISO 21528-1:2004 má status české technické normy.

This standard is the Czech version of the International Standard ISO 21528-1:2004. The International Standard ISO 21528-1:2004 has the status of a Czech Standard.

Nahrazení předchozích norem

Touto normou spolu s ČSN ISO 21528-2 z února 2006 se nahrazuje ČSN ISO 8523 (56 0096) z října 1995 a ČSN ISO 7402 (56 0108) z října 1995.

 

 

 

 

 

© Český normalizační institut, 2006                                                                                         74972
Podle zákona č. 22/1997 Sb. smějí být české technické normy rozmnožovány
a rozšiřovány jen se souhlasem Českého normalizačního institutu.

 


Strana 2

Národní předmluva

Změny proti předchozí normě

Nová norma slučuje v části 1 průkaz přítomnosti a stanovení nízkých počtů technikou MPN s využitím jednoho postupu zkoušky. Podle dosavadních ISO 7402 a ISO 8523 byly tyto postupy prováděny odděleně. I ve formálně novém členění jsou zachovány osvědčená selektivní media i konfirmační testy. Věcné změny se týkají MPN, kdy se na rozdíl od ISO 7402 nepoužívá selektivní půda o dvojnásobné koncentraci, neboť předchází neselektivní předpomnožení.

Citované normy

ISO 6887-1:1999 zavedena v ČSN EN ISO 6887-1:1999 (56 0102) Mikrobiologie potravin a krmiv - Úprava analytických vzorků, příprava výchozí suspenze a desetinásobných ředění - Část 1: Všeobecné pokyny pro přípravu výchozí suspenze a desetinásobných ředění

ISO 6887-2:2003 zavedena v ČSN EN ISO 6887-2:2004 (56 0102) Mikrobiologie potravin a krmiv - Úprava analytických vzorků, příprava výchozí suspenze a desetinásobných ředění - Část 2: Specifické pokyny pro vzorky masa a masných výrobků

ISO 6887-3:2003 zavedena v ČSN EN ISO 6887-3:2004 (56 0102) Mikrobiologie potravin a krmiv - Úprava analytických vzorků, příprava výchozí suspenze a desetinásobných ředění - Část 3: Specifické pokyny pro vzorky ryb a rybích výrobků

ISO 6887-4:2003 zavedena v ČSN EN ISO 6887-4:2004 (56 0102) Mikrobiologie potravin a krmiv - Úprava analytických vzorků, příprava výchozí suspenze a desetinásobných ředění - Část 4: Specifické pokyny pro vzorky jiné než mléko a mléčné výrobky, maso a masné výrobky a ryby a rybí výrobky

ISO 7218:1996 zavedena v ČSN ISO 7218:1998 (56 0103) Mikrobiologie potravin a krmiv - Všeobecné pokyny pro mikrobiologické zkoušení

ISO 8261:2001 zavedena v ČSN ISO 8261:2002 (56 0111) Mléko a mléčné výrobky - Všeobecné pokyny pro úpravu analytických vzorků, přípravu výchozích suspenzí a desetinásobných ředění pro mikrobiologické zkoušení

ISO/TS 11133-1 zavedena v ČSN P ENV ISO 11133-1:2001 (56 0099) Mikrobiologie potravin a krmiv -
Všeobecné pokyny pro přípravu a výrobu kultivačních půd - Část 1: Všeobecné pokyny pro zabezpečování jakosti při přípravě kultivačních půd v laboratoři

ISO/TS 11133-2 zavedena v ČSN P CEN ISO/TS 11133-2:2005 (56 0099) Mikrobiologie potravin a krmiv -
Všeobecné pokyny pro přípravu a výrobu kultivačních půd - Část 2: Pokyny pro zkoušení výkonnosti kultivačních
půd v praxi

Vypracování normy

Zpracovatel: RNDr. Vladimír Špelina, CSc., IČ 43901433

Pracovník Českého normalizačního institutu: Ing. Linda Pleštilová


Strana 3

MEZINÁRODNÍ NORMA

Mikrobiologie potravin a krmiv - Horizontální metody                                 ISO 21528-1
pro průkaz a stanovení počtu bakterií čeledi                                                
První vydání
Enterobacteriaceae -                                                                                             
2004-08-15
Část 1: Průkaz a stanovení počtu technikou
nejvýše pravděpodobného počtu s předpomnožením

ICS 07.100.01

Obsah

Strana

Předmluva......................................................................................................................................................................................... 4

Úvod................................................................................................................................................................................................... 5

1          Předmět normy.................................................................................................................................................................... 5

2          Normativní odkazy............................................................................................................................................................... 5

3          Definice................................................................................................................................................................................. 6

4          Podstata zkoušky................................................................................................................................................................ 6

4.1       Průkaz bakterií čeledi Enterobacteriaceae (viz příloha A)............................................................................................ 6

4.2       Stanovení počtu technikou MPN (viz příloha B)............................................................................................................. 7

5          Ředicí roztok, kultivační půdy, reagencie........................................................................................................................ 7

6          Přístroje a pomůcky.......................................................................................................................................................... 10

7          Vzorkování........................................................................................................................................................................... 10

8          Úprava analytického vzorku............................................................................................................................................. 10

9          Postup zkoušky.................................................................................................................................................................. 11

9.1       Všeobecně.......................................................................................................................................................................... 11

9.2       Metoda průkazu.................................................................................................................................................................. 11

9.3       Metoda nejvýše pravděpodobného počtu (technika MPN)........................................................................................ 11

9.4       Izolace a výběr kolonií pro konfirmaci............................................................................................................................ 11

9.5       Subkultivace vybraných kolonií........................................................................................................................................ 12

9.6       Biochemická konfirmace................................................................................................................................................. 12

10        Vyjádření výsledků............................................................................................................................................................. 12

10.1     Konfirmované pozitivní zkumavky................................................................................................................................... 12

10.2     Metoda průkazu.................................................................................................................................................................. 12

10.3     Metoda stanovení počtu: vyčíslení nejpravděpodobnějšího počtu........................................................................... 12

11        Shodnost............................................................................................................................................................................. 12

12        Protokol o zkoušce............................................................................................................................................................ 12

Příloha A (normativní)  Diagram postupu zkoušky při průkazu............................................................................................. 13

Příloha B (normativní)  Diagram postupu zkoušky při technice MPN.................................................................................. 14


Strana 4

Předmluva

ISO (Mezinárodní organizace pro normalizaci) je celosvětovou federací národních normalizačních orgánů (členů ISO). Na mezinárodních normách obvykle pracují technické komise ISO. Každý člen ISO, který se zajímá o předmět, pro který byla vytvořena technická komise, má právo být zastoupen v této technické komisi. Práce se zúčastňují i mezinárodní organizace, vládní i nevládní, s nimiž ISO navázala pracovní styk. ISO úzce spolupracuje s Mezinárodní elektrotechnickou komisí (IEC) ve všech záležitostech normalizace v elektrotechnice.

Mezinárodní normy se navrhují v souladu s pravidly uvedenými ve směrnicích ISO/IEC, části 2.

Hlavním úkolem technických komisí je připravovat mezinárodní normy. Návrhy mezinárodních norem přijaté technickými komisemi se rozesílají členům ISO k hlasování. Vydání mezinárodní normy vyžaduje souhlas alespoň 75 % z hlasujících členů.

Je třeba věnovat pozornost možnosti, že některé prvky tohoto dokumentu mohou být předmětem patentových práv. Organizace ISO nesmí být hodnocena jako odpovědná za ztotožnění se s žádným z takových patentových práv.

První vydání ISO 21528-2 spolu s ISO 21528-1:2004 ruší a nahrazuje následující normy:

      ISO 5552:1997 Maso a masné výrobky - Průkaz a stanovení počtu bakterií čeledi Enterobacteriaceae bez resuscitace - Technika nejvýše pravděpodobného počtu a technika počítání kolonií;

      ISO 7402:1993 Mikrobiologie - Všeobecné pokyny pro stanovení počtu bakterií čeledi Enterobacteriaceae bez resuscitace - Technika nejvýše pravděpodobného počtu a technika počítání kolonií;

      ISO 8523:1991 Mikrobiologie - Všeobecné pokyny pro průkaz bakterií čeledi Enterobacteriaceae s předpomnožením.

ISO 21528-1 byla připravena technickou komisí ISO/TC 34 Zemědělské potravinářské výrobky, subkomisí SC 9
Mikrobiologie.

ISO 21528 sestává z následujících částí se společným názvem Mikrobiologie potravin a krmiv - Horizontální metoda pro průkaz a stanovení počtu bakterií čeledi Enterobacteriaceae:

      Část 1: Průkaz a stanovení počtu technikou nejvýše pravděpodobného počtu s předpomnožením

      Část 2: Technika počítání kolonií


Strana 5

Úvod

Tato část ISO 21528 je určena k tomu, aby poskytla obecné pokyny pro zkoušení výrobků, na něž se nevztahují existující mezinárodní normy, a aby byla vzata do úvahy organizacemi, které připravují zkušební metody pro použití u potravin a krmiv. Vzhledem k velké různorodosti výrobků, které jsou potravinami a krmivy, nemusí být tato horizontální metoda ve všech detailech pro určité výrobky vhodná. V takovém případě mohou být použity odlišné metody, je-li to zcela nezbytné z oprávněných technických důvodů. Předpokládá se však, že ve všech případech, kdy je to možné, bude použita tato horizontální metoda.

Při nejbližší revizi této části ISO 21528 budou vzaty v úvahu všechny dostupné informace o rozsahu, v jakém byla tato horizontální metoda aplikována, a o důvodech, které vedly k nezbytnosti odchylek od ní v případě určitých výrobků.

Harmonizace metod zkoušení nemůže být okamžitá a pro určité skupiny výrobků již mohou existovat mezinárodní a/nebo národní normy, které nejsou v souladu s touto horizontální metodou. Předpokládá se však, že při revizi budou takové normy uvedeny do souladu s touto částí ISO 21528 s tím, že případné odchylky od této horizontální metody budou pouze takové, které jsou technicky dobře odůvodněné.

1 Předmět normy

Tato část ISO 21528 specifikuje metodu s předpomnožením pro průkaz bakterií čeledi Enterobacteriaceae, která je použitelná pro

      výrobky určené k lidské výživě a ke krmení zvířat

      vzorky z prostředí potravinářských výroben a prostor, kde se manipuluje s potravinami.

Stanovení počtu se provádí vyčíslením nejvýše pravděpodobného počtu (MPN) po ikubaci při 37 °C
(ne
bo při 30 °C) 1) v tekutém mediu.

Tato technika je použitelná

      když se předpokládá, že zjišťované mikroorganismy potřebují resuscitaci před pomnožením, a

      když se předpokládá, že zjišťovaný počet bude v rozmezí 1 až 100 na mililitr nebo gram analytického vzorku.

Omezená použitelnost této části ISO 21528 je dána citlivostí metody vůči velkému stupni variability (viz kapitola 11).



-- Vynechaný text --

Zdroj: www.cni.cz